DIALPED

U badanych dzieci wykonano następujące oznaczenia :

Homocysteina całkowita - oznaczana w osoczu, moczu i dializacie metodą wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej (HPLC) wg Maansoora i wsp [45]. Próbki krwi pobierane były od dzieci na czczo rano (średnio po 12 godzinnym okresie głodzenia), u dzieci hemodializowanych przed i po zabiegu hemodializy. Krew zbierana była do probówek zawierających 1% EDTA, następnie wirowana ok.3000/sek i zamrażana w temp.-200C. Próbki z dobowej zbiórki moczu i dializatu z jamy otrzewnowej były także wirowane i zamrażane w tych samych warunkach.
Witamina B12 i kwas foliowy w surowicy oznaczane były metodą radioimmunologiczaą za pomocą gotowych zestawów firmy ICN Pharmaceuticals (SimulTRAC-SNB).
Parametry układu krzepnięcia :
- czas kaolinowo-kefalinowy (APTT), czas protrombinowy, fibrynogen
- produkty rozpadu fibryny stabilizowanej D-Dimery metodą immunoenzymatyczną (ELISA) przy użyciu przeciwciał monoklonalnych firmy Behring
- aktywność antytrombiny III metodą koagulometryczną zestawem firmy Behring (zasada polega na pomiarze czasu APTT po zmieszaniu badanego osocza, zawierającego AT III z odczynnikiem czyli heparyną i trombiną; na podstawie wydłużenia czasu APTT określa się aktywność AT III w badanym osoczu wyrażoną w %)
- aktywność białka C metodą koagulometryczną zestawem firmy Behring (test polega na pomiarze czasu APTT po zmieszaniu osocza deficytowego w białko C i osocza badanego oraz aktywatora białka C, na podstawie wydłużenia czasu APTT określa się aktywność białka C wyrażoną w %)
- oporność na aktywowane białko C (activated protein C resistance - APC-R): badanie polega na pomiarze czasu APTT po dodaniu aktywowanego białka C i chlorku wapnia. Następnie oblicza się stosunek czasu z APC do normalnego czasu APTT. U osób z opornością na aktywowane białko C dochodzi do skrócenia czasu wytworzenia skrzepu w porównaniu z osobami zdrowymi i wskaźnik APC wynosi poniżej 2. Do oznaczenia użyto zestawu COATEST APC resistance firmy Chromogenix. Krew na parametry hemostatyczne pobierana była do oddzielnej probówki z 3,2% cytrynianem sodu, następnie wirowana ok.3000/min i przechowywana do niektórych oznaczeń w temp.-70 0C.
Parametry biochemiczne: mocznik, kreatynina, białko całkowite, albuminy oraz morfologia krwi i liczba płytek.
Wskaźniki skuteczności dializy: Kt/V oraz tygodniowy klirens kreatyniny, a także współczynnik katabolizmu białkowego (pcr) i klirensy kreatyniny zostały obliczone w opraciu o programy służące do oceny adekwatności dializy i wydolności nerek, (dla dzieci hemodializowanych użyto programu Dial.5.2, a dla dzieci dializowanych otrzewnowo oraz w okresie przeddializacyjnym - programu Nephron).

Analizę statystyczną wyników przeprowadzono przy użyciu pakietu statystycznego Statistica for Windows, do porównywania uzyskanych wyników zastosowano testy nieparametryczne dla niezależnych próbek: test U-Manna-Whitneya i Kołmogorowa-Smirnowa. Korelacje pomiędzy danymi obliczono współczynnikiem korelacji rang Spearmana.

Badania były finansowanego z grantu KBN nr 0743/P05/98/14. Na przeprowadzenie badania otrzymano zgodę Komisji Etycznej ds.Badań Klinicznych CMUJ nr: KE/98/07/B/1997.